Étude des propriétés biologiques des brucella responsables de la maladie et leur distribution en Algérie

Abstract

La brucellose est une maladie infectieuse, contagieuse, commune à de nombreuses espèces animales et à l’Homme. Elle sévit sous forme endémique dans la plupart des régions du monde. En Algérie, toutes les données relatives à la brucellose, sont issues d’enquêtes sérologiques. Très peu d’études rapportent l’isolement, l’identification et la distribution des souches de Brucella existantes dans notre pays. Ce qui nous a conduit donc à mener notre étude ayant pour objectifs, d’identifier les souches de Brucella responsables de la brucellose bovine en Algérie ; d’établir la distribution épidémiologique de ces souches isolées, de détecter le genre Brucella par PCR en temps réel (PCR-TR) et de procéder à leur typage moléculaire afin de les comparer aux souches humaines déjà isolées. Notre étude s’articule autour de deux parties : la première est la caractérisation phénotypique des souches bovines algériennes et la deuxième est la caractérisation moléculaire des souches maghrébines animales et humaines. Dans la première partie, d’octobre 2011 à mai 2014, nous avons étudié 161 bovins séropositifs, issus de 13 wilayas, des quatre régions d’Algérie : Centre, Ouest, Est et Sud. Ces derniers ont fait l’objet de 298 prélèvements, dont 109 prélèvements de lait et 189 de ganglions lymphatiques; grâce au réseau national vétérinaire, que nous avons mis en place avec la collaboration des services vétérinaires. La caractérisation phénotypique a été réalisée selon la norme française AFNOR NF U47-105. La sensibilité aux antibiotiques des souches isolées a été testée par la méthode E-test pour 6 antibiotiques. Puis, nous avons effectué une recherche du genre Brucella par la méthode PCR en temps réel sur 84 prélèvements de ganglions lymphatiques prélevés sur 48 bovins séropositifs. Nous avons pu isoler 97 souches de Brucella à partir de 41 ganglions rétro-mammaires, 35 laits, 18 ganglions rétro-pharyngiens et 3 inguinaux. Ces souches ont été identifiées dans 87% à B. abortus et dans 13% à B. melitensis. Parmi lesquelles 77 souches sont typées en biovars : 86% en B. abortus bv 3, 10% en B. melitensis bv 2, 3% en B. melitensis bv 3 et 1% en B. abortus bv 2. B. abortus bv 3 est le biovar dominant, retrouvé dans toutes les régions étudiées, alors que B. melitensis bv 2 est isolé principalement à l’Ouest. C’est la première fois que B. melitensis bv 2 et B. abortus bv 2 sont rapportées dans la région du Maghreb. Nous avons détecté 4 souches de B. abortus bv 3 résistantes à la streptomycine. La détection des Brucella par la méthode PCR-TR sur 84 noeuds lymphatiques révèle un taux de positivité de 38% vs 34,5 % pour la bactériologie. La PCR-TR semble donc plus sensible que la bactériologie. Comme pour la bactériologie, les ganglions rétro-mammaires sont les plus fréquemment infectés par Brucella. Dans la deuxième partie, nous avons comparé le génotype de la souche B. melitensis bv 3 bovine, à 02 souches ovines et 87 souches humaines de B. melitensis bv 3. Ces souches isolées durant une période de 25 ans (de 1989 à 2014), d’origines algérienne (56), marocaine (14), tunisienne (13) et au sens large maghrébines (7) quand l’origine exacte est indéterminée. Puis, nous avons comparé les génotypes des souches B. abortus bv 3 bovines, à une souche humaine B. abortus bv 3 de d’origine algérienne d’un cas importé en France. Un total de 90 souches maghrébines de B. melitensis bv 3, et 16 souches algériennes de B. abortus bv 3 ont été analysées par la méthode MLVA-16. Les résultats obtenus ont été comparés aux génotypes publiés des souches de B. melitensis bv 3 européennes et B. abortus bv 3 européennes et africaines. L’analyse moléculaire des B. melitensis bv 3 montre que les souches algériennes sont réparties principalement en deux clusters distincts, un cluster algéro-marocain relié à un sous-cluster européen et un cluster algéro-tunisien. Ces résultats suggèreraient l’existence de deux lignées, une résultant des échanges socio-économiques et historiques entre l’Algérie et l’Europe qui aurait pu évoluer distinctement de la deuxième lignée Maghrébine autochtone. L’analyse moléculaire des B. abortus bv 3 répartie les souches en deux clusters : un cluster africain et un cluster algéro-européen. Ce qui montre une proximité phylogéographique des souches algériennes et européennes, suggérant que l’origine de la brucellose bovine en Algérie pourrait être en lien avec l’importation d’animaux infectés à partir d’Europe. Notre étude constitue la première enquête moléculaire sur les souches B. melitensis bv 3 circulant au Maghreb et les souches B. abortus bv 3 circulant en Algérie.